细胞培养步骤

1.解冻细胞步骤

①细胞保存在-196℃的液氮罐中，需取出后在37℃水浴锅中摇晃解冻融化或者用法细胞复苏仪解冻。

②将解冻好的细胞转移到生物安全柜内，用移液器吸出，转移至离心管中在离心机中离心。

③将离心好的的细胞在生物安全柜内用移液器弃掉上清液，加入合适的培养基，接种在培养皿内放在二氧化碳培养箱中培养。

2.传代冻存步骤

①将在二氧化碳培养箱中的细胞取出在显微镜下观察，然后进行消化。

②用移液器吸掉上清，加入清洗液清洗后，转移至离心管中离心。

③取20ul加入冷冻液的细胞悬液用细胞计数器计数得出细胞总量

④将离心后的细胞取出加入冷冻液冻存后用程序降温仪转移至-80超低温冰箱24h后再转移至液氮罐中存储。